大腸菌群檢測(cè)法介紹:
大腸菌群檢測(cè)法包含酶底物法檢測(cè)儀器、51 孔 / 97 孔定量檢測(cè)盤、橡膠托墊、DST 酶底物試劑、無(wú)菌取樣瓶等全套核心設(shè)備與耗材,符合《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》(GB 5750-2006)及《水質(zhì) 總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測(cè)定 酶底物法》(HJ 1001-2018)標(biāo)準(zhǔn)要求,助力政府監(jiān)管、水務(wù)公司、食品飲料企業(yè)、疾控等用戶,完成水質(zhì)微生物檢測(cè)工作,充分發(fā)揮酶底物方法的技術(shù)優(yōu)勢(shì)。
已經(jīng)列入:
(1)GB/T5750.12-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》微生物指標(biāo)。
(2)NY/T 1665-2008《畜牧用水中總大腸菌群和大腸埃希氏菌的測(cè)定-酶底物法》
(3)HJ 1001-2018《中華人民共和國(guó)國(guó)家環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)-水質(zhì)總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測(cè)定-酶底物法》。
方法優(yōu)勢(shì):
(1)無(wú)需在無(wú)菌室內(nèi)操作。
(2)手工操作時(shí)間小于1分鐘。
(3)無(wú)需培養(yǎng)基制備和大量玻璃器皿滅菌。
(4)24小時(shí)即可完成定性定量分析,無(wú)需驗(yàn)證試驗(yàn)。
固定底物技術(shù)酶底物法原理:
酶底物法原理采用總大腸菌群產(chǎn)生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-B-D-galactopyranoside)使培養(yǎng)液呈黃色;大腸埃希氏菌產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解熒光色源底物MUG(4-methyl-umbeliferyl-β-glucuronide )使培養(yǎng)液在波長(zhǎng)366nm紫外光下產(chǎn)生熒光的原理,來(lái)定性定量水中總大腸菌群、微大腸菌群(耐熱大腸菌群)及大腸埃希氏菌,Colitech酶底物法試劑是采用GB/T5750.12-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法》中固定底物技術(shù)(Defined SubstrateTechnology,DST)的Minimal Medium ONPG-MUG (MMO-MUG)和環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)HJ 1001-2018的培養(yǎng)基。當(dāng)Colitech酶底物法檢測(cè)試劑加入含有總大腸菌群細(xì)菌組的水樣,目標(biāo)細(xì)菌在含有固定底物Minimal Medium ONPG-MUG的培養(yǎng)基中繁殖,大腸菌群細(xì)菌組產(chǎn)生的特異性生物酶β-半乳糖苷酶能分解MinimalMedium ONPG-MUG培養(yǎng)基中的固定色原底物ONPG,使培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色;同時(shí)水樣中大腸埃希氏菌產(chǎn)生特異性β-葡糖苷酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培養(yǎng)基中的固定熒光底物MUG,產(chǎn)生特征性藍(lán)色熒光。同樣原理,耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)在44.5℃培養(yǎng)時(shí)會(huì)分解Minimal Medium 0NPG-MUG培養(yǎng)基中的色源底物ONPG,使培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色。因而可以定性檢測(cè)水中總大腸菌群、耐熱(糞)大腸菌群和大腸埃希氏菌。當(dāng)水樣中少數(shù)非目標(biāo)細(xì)菌的生物酶試圖和ONPG或MUG反應(yīng),干擾檢測(cè)結(jié)果時(shí),colitech培養(yǎng)基中特殊配方的基質(zhì)會(huì)抑制其反應(yīng)進(jìn)程,控制假性的產(chǎn)生;同時(shí),這些特殊配方基質(zhì)可以有效促使目標(biāo)細(xì)菌的生物酶和固定底物反應(yīng),所以假陰性發(fā)生率比傳統(tǒng)方法更低。Colitech酶底物法試劑和51或97孔定量檢測(cè)盤聯(lián)合使用,可以定量檢測(cè)100毫升水樣中目標(biāo)細(xì)菌,51孔定量檢測(cè)盤檢測(cè)范圍0-200MPN,97孔定量檢測(cè)盤檢測(cè)范圍0-2419MPN,而不需稀釋。
程控定量封口機(jī)技術(shù)參數(shù):
(1)預(yù)熱時(shí)間:2~3min;
(2)封口速度:51 孔/97 孔定量檢測(cè)盤封口時(shí)間<9 秒/個(gè)
(3)檢測(cè)范圍:配合 51 孔定量檢測(cè)盤檢測(cè)范圍:0-200MPN/100ml(水樣不稀釋);配合 97
(4)孔定量檢測(cè)盤檢測(cè)范圍:0-2419MPN/100ml(水樣不稀釋);
(5)可靠性:封口后無(wú)漏液和破孔
(6)方便性:儀器使用壽命期內(nèi)可檢測(cè)樣品>50,000 個(gè)
手持式紫外線分析儀帶暗室技術(shù)參數(shù):
(1)波長(zhǎng):雙波長(zhǎng)(254nm,366nm);
(2)工作電壓:AC 220V±10%,50Hz
耗材參數(shù):
(1)酶底物法檢測(cè)試劑:200個(gè)/盒
(2)100ml定量瓶/取樣瓶:200個(gè)/箱
(3)97/51 定量孔板/定量檢測(cè)盤:100個(gè)/箱









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